Архив
Редакция


Обзоры
Статьи
Обмен опытом
Исторический архив
Новости Минздравсоцразвития России
Новости ГИСКа
Новости ВОЗ
Новости науки
Конгрессы, съезды, конференции
Хроника
Интервью
Некролог

Всероссийская научно-практическая
конференция «Вакцинология-2010»

Главная / Всероссийская научно-практическая конференция «Вакцинология-2010» / Глубинное культивирование бактерий Bordetella pertussis для получения коклюшного компонента иммунобиологических препаратов

Глубинное культивирование бактерий Bordetella pertussis для получения коклюшного компонента иммунобиологических препаратов


Удотов Ю.М., Увицкий А.Ю.
ОАО «Биомед», г. Москва

В настоящее время для получения коклюшного компонента комбинированных вакцин и производства диагностических препаратов применяют метод поверхностного культивирования Bordetella pertussis на питательной среде КУА. Несмотря на очевидные положительные свойства метода, он обладает рядом существенных недостатков, затрудняющих стандартизацию процесса и снижающих выход микробной массы. За последние годы был предложен ряд вариантов культивирования B. pertussis на жидких питательных средах, однако ни один из них до сих пор не получил промышленного внедрения в России.

Нами было проведено исследование глубинного культивирования B. pertussis с целью получения промышленного объема биомассы. Среду для культивирования готовили ex tempore, выполняя стерилизующую фильтрацию без предварительного автоклавирования. Культивирование проводили при температуре (36 ± 1) оС при непрерывном перемешивании под ватномарлевыми пробками. В качестве посевного материала использовали культуру III пассажа B. pertussis, проверенную по показателям микробиологической чистоты и морфологии. Посевная доза для одной бутыли составляла 20 мл культуры с содержанием микробных клеток 80 – 100 млрд/мл. Таким образом, исходное содержание микробных клеток в жидкой питательной среде составляло не более 1 МОЕ/мл.

В процессе культивирования с периодичностью 24 ч. проводили контроль микробиологической чистоты, морфологии, содержания микробных клеток, а также специфических агглютиногенов 1, 2 и 3. Установлено, что наиболее интенсивный рост культуры происходил в первые 24 ч, при этом максимальное содержание микробных клеток по окончании роста составляло 35 – 40 МОЕ/мл. Рост культуры существенно замедлялся при повышении показателя рН до 7.5 и прекращался при рН 8,0. Критичными параметрами в отношении скорости роста и содержания микробных клеток были кратность воздухообмена и содержание дрожжевого экстракта в составе питательной среды. Наличие сорбента (активированный уголь) не влияло на скорость роста и содержание микробных клеток, но в его отсутствие агглютинация со специфическими сыворотками отсутствовала, в том числе и с фактором I (видовой фактор B.pertussis). Сорбент вводили в состав среды в фиксированном виде, дополнительной его элиминации из готового продукта не требовалось.

В настоящее время отделением сорбированных препаратов ОАО «Биомед» проводится работа по внедрению технологии культивирования B. pertussis на жидкой питательной среде для получения коклюшного диагностикума. В качестве перспективной разработки рассматривается также получение на жидкой среде коклюшного компонента вакцины АКДС.

 статья из журнала № 3 [39] ноябрь 2010


Главная / Всероссийская научно-практическая конференция «Вакцинология-2010» / Глубинное культивирование бактерий Bordetella pertussis для получения коклюшного компонента иммунобиологических препаратов


Научно-практический журнал "Биопрепараты"
Адрес редакции: ФГУН "ГИСК им. Л.А.Тарасевича" Минздравсоцразвития РФ, 119002, Москва, пер. Сивцев Вражек, 41.
Журнал зарегистрирован в Комитете РФ по печати ПИ №ФС77-26255 от 24.11.2006 г.

web@medep.ru


Совместный проект «Центр иммунопрофилактики МЕДЭП» и «Гелла-Принт»