Архив
Редакция


Обзоры
Статьи
Обмен опытом
Исторический архив
Новости Минздравсоцразвития России
Новости ГИСКа
Новости ВОЗ
Новости науки
Конгрессы, съезды, конференции
Хроника
Интервью
Некролог

Всероссийская научно-практическая
конференция «Вакцинология-2010»

Главная / Всероссийская научно-практическая конференция «Вакцинология-2010» / Методические особенности определения чувствительности наборов реагентов, предназначенных для выявления РНК вирусов методом обратной транскрипции-полимеразной цепной реакцией

Методические особенности определения чувствительности наборов реагентов, предназначенных для выявления РНК вирусов методом обратной транскрипции-полимеразной цепной реакцией


Сизикова Т.Е., Мельникова Е.В., Меркулова О.В., Мельников Д.Г., Петров А.А., Меркулов В.А.
Филиал ФГУ «48 Центральный научно-исследовательский институт Министерства обороны Российской Федерации – Вирусологический центр» г. Сергиев Посад Московской обл., Россия

Целью работы является анализ методических аспектов определения чувствительности амплификационных наборов реагентов, предназначенных для выявления РНК вирусов методом обратной транскрипции – полимеразной цепной реакцией (ОТ ПЦР). Проведенный анализ основывается на результатах, полученных при испытании ОТ – ПЦР набора реагентов для выявления РНК возбудителя Аргентинской геморрагической лихорадки – вирус Хунин. За чувствительность того или иного метода обычно принимают минимальное количество концентрацию возбудителя, которое можно выявить с помощью данного метода.

На практике для определения чувствительности метода используют формулу: S = АхР,

где: S – чувствительность метода выраженная в УЕ·мл–1, А – концентрация возбудителя в препарате, УЕ·мл–1, Р – высшее разведение исследуемого препарата, в котором еще наблюдают положительную реакцию, УЕ – условная единица.

В проведенных экспериментах по определению чувствительности набора реагентов для выявления РНК вируса Хунин установлено, что расчетная чувствительность (Sp) составляет 3,5·102 БОЕ·мл–1, ошибка метода (s) равна х/: 2,82.

Максимальную и аналитическую чувствительность определяли по формулам:

Sm=Spхs (2),
Sm=Spхsх1,96 (3),

где: Sm – максимальная чувствительность набора реагентов, Saн – аналитическая чувствительность набора реагентов, 1,96 – коэффициент Фишера – Стьюдента для уровня надежности Р = 0,05 для числа степеней свободы n.

Определенные в результате проведенных исследований величины максимальной (Sm= 1,0·103БОЕ·мл–1)и аналитической (Saн = 2,0·103БОЕ·мл–1) чувствительности следует использовать при определении, как воспроизводимости так и специфичности набора реагентов для выявления РНК вируса Хунин методом ОТ-ПЦР.

 статья из журнала № 3 [39] ноябрь 2010


Главная / Всероссийская научно-практическая конференция «Вакцинология-2010» / Методические особенности определения чувствительности наборов реагентов, предназначенных для выявления РНК вирусов методом обратной транскрипции-полимеразной цепной реакцией


Научно-практический журнал "Биопрепараты"
Адрес редакции: ФГУН "ГИСК им. Л.А.Тарасевича" Минздравсоцразвития РФ, 119002, Москва, пер. Сивцев Вражек, 41.
Журнал зарегистрирован в Комитете РФ по печати ПИ №ФС77-26255 от 24.11.2006 г.

web@medep.ru


Совместный проект «Центр иммунопрофилактики МЕДЭП» и «Гелла-Принт»